试题详情
简答题如何分离微生物的各种亚细胞结构，其原理是什么？
  • 亚细胞结构的分离
    采用离心法，自细胞破碎液中分离不同的亚细胞结构 利用颗粒大小的不同
    1） 差速离心（differential centrifugation）：
    用于分离大小、形状显著不同的组分，根据颗粒沉降速度不同得以分离，可将形状、大小不同的颗粒，在不同的离心力下分开
    将细胞裂解液先在低速下离心一定时间，大颗粒沉下，中、小颗粒悬浮在上清液中；
    将上清液在加高转速的情况下离心，得到中等颗粒的沉淀，小颗粒仍悬浮在上清液中；
    再加高转速离心小颗粒也沉出；
    逐步加高转速离心，可将具有不同沉降速度的各种亚细胞结构的颗粒分开。
    3000-5000×g离心5-10min，可沉下细菌细胞；
    20000-50000×g离心20min，可沉下细胞壁碎片和较大的膜结构；
    200000×g离心 lh可沉下小的膜泡囊或核蛋白体。
    2） 区带离心（zonal centrifugation）
    速度区带离心法：用于分离大小差别不显著的组分
    采用的介质是不同浓度梯度的蔗糖溶液，可防止离心时形成上下对流，因此在一次高速离心下，可将颗粒大小不同的物质，按沉降速度不同分成一些区带，颗粒大小相同的物质会聚集成一区带。
    利用颗粒密度的不同
    3） 平衡密度梯度离心（equilibrium density gradient centrifugation）
    按细胞组分的浮力密度不同进行分离的方法。适用于大小、形态相似而密度不同的组分。
    用于分离各种膜结构。因为来自同一种膜的碎片，在形状、大小上可能相差很大，但它们的密度是相同的。

  • 关注下方微信公众号，在线模考后查看

热门试题