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简答题酶联免疫吸附法筛选分泌抗体的融合细胞?
  • ①酶联免疫吸附法(ELISA.主要是基于抗原或抗体能吸附至固相载体的表面并保持其免疫活性,抗原或抗体与酶形成的酶结合物仍保持其免疫活性和酶催化活性的基本原理。
    ②在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应,形成的抗原抗体复合物,加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,根据颜色反应的深浅进行定性或定量分析。
    ③将融合的细胞进行充分稀释,使分配到培养板的每一孔中的细胞数在0至数个细胞之间,培养一段时间后取上清以ELISA法选出抗体高分泌性的细胞。
    ④找出针对目标抗原的抗体阳性细胞株,增殖后冻存、体外培养或动物腹腔接种培养生产抗体。
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