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简答题单细胞培养的几种方法是什么?请叙述。
  • 看护培养法、平板培养法、微室培养法
    看护培养法:是把单个细胞置于一块活跃生长的愈伤组织(也称看护愈伤组织)上培养,在愈伤组织和培养的细胞之间,用一片滤纸隔开。
    平板培养法:将含有游离细胞和细胞团的悬浮培养物过滤,除去组织块和大的细胞团,保留游离细胞和小细胞团。将液体培养基加入6-10g/L的琼脂,使其融化,冷却到35℃时,将培养基与上述细胞悬浮培养液等量混合,迅速使之铺展在培养皿。
    微室培养法:由悬浮培养物中取出一滴含单细胞的培养液,置于一张无菌载玻片上,在培养基的四周与之隔一定距离涂上一圈石蜡油,然后在左右两侧各加一滴石蜡油并分别置一张盖玻片,第三张盖玻片架在前两个盖玻片之间,这样一滴含有单细胞的培养液就被覆盖于微室之中,最后把筑有微室的整张载玻片置于培养皿中进行培养。当细胞团长到一定大小时,将其转移到新鲜的液体或半固体培养基上培养。
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