试题详情
- 简答题简述PCR技术的基本原理。
-
P.CR技术的基本原理:类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:1)模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;
2)模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;3)引物的延伸:DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程,就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2~4分钟,2~3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。(Plateau)。到达平台期所需循环次数取决于样品中模板的拷贝。 关注下方微信公众号,在线模考后查看
热门试题
- 请分期简述急性黄疸型肝炎的临床表现。
- 手足口病在发热的同时往往会伴有发疹,发疹
- 卡介苗在使用冷藏箱运输时应放置在()层。
- 婴幼儿辅助食品指母乳以外添加的食物,辅助
- 窗口期是指,人体感染()后,直到()能检
- 我国法定的传染病分为()
- 食品微生物学检验大肠菌群计数(GB478
- 根据菌体(O)抗原不同,目前已将霍乱弧菌
- 2006年糖尿病患病率是()。
- 公众中个人全身受到的年有效剂量当量限值(
- 用数量的变化来估计疾病流行的强度常用的术
- 当环境温度高于皮肤温度,机体能通过传导、
- 检验副溶血性弧菌致病性的试验是()
- 治疗疾病的前提是()
- 简述白喉杆菌的形态及染色特性。
- 生化、霉菌、恒温培养箱怎么区分和选择?
- 简述健康促进的内涵?
- 接种单位应当根据预防接种工作的需要,制定
- 对于外照射急性放射病应必须进行哪些检查(
- 运动干预的根本目的,以下正确的说法是()