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- 简答题简述吸附柱色谱分离主要步骤及操作。
- （1）色谱柱的选择
色谱柱通常用玻璃柱。柱入口端应该有进料分布器，柱顶端加一层多孔的尼龙圆片或保持一段缓冲液层，柱底部可以用玻璃棉或砂芯玻璃板。
（2）装柱
①干法装柱
在柱下端加少许棉花或玻璃棉，再轻轻地撒上一层5mm厚的干净砂粒。打开下口，然后将吸附剂经漏斗缓缓加入柱中，同时轻轻敲动色谱柱，使吸附剂松紧一致将最初洗脱剂小心沿壁加入，至刚好覆盖吸附剂顶端平面，关紧下口活塞。
②湿法装柱
吸附剂中加入适量洗脱剂调成稀糊状，再把放好棉花或砂芯的下口打开，然后徐徐将制好的糊浆灌入柱子。操作要慢，不要将气泡压入吸附剂中，而且要始终保持吸附剂上有溶剂，最后让吸附剂自然下沉。当洗脱剂刚好覆盖吸附剂平面时，关紧下口活塞。
（3）上样
①湿法上样
把被分离的物质溶在少量洗脱剂中，小心加在吸附剂上层，注意保持吸附剂上表面仍为一水平面。
②干法上样
选用一种对样品溶解度大而且沸点低的溶剂，取尽可能少的溶剂将样品溶解。再溶液中加入少量吸附剂，拌匀，挥干溶剂，研磨使之成松散均匀的粉末，轻轻撒在色谱柱吸附剂上面，再撒一层细砂。
（4）洗脱
在装好吸附剂的色谱柱中缓缓加入洗脱剂，进行剃度洗脱，各组分先后被洗出。采用薄层色谱定性检查各流分中的化学成分组成。含单一色点的部分用合适的溶剂结晶；仍为混合物的部分进一步寻找分离方法再进行分离。 关注下方微信公众号，在线模考后查看
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