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简答题什么是同聚尾连接法?具有哪些优缺点?
  • 同聚尾连接法是利用末端转移酶在载体和外源DNA的3‘端各加上一段互补的寡聚核苷酸,形成人工粘性末端,然后在DNA连接酶的作用下,连接成重组DNA。
    其优点在于
    (1)由于同一DNA两端粘尾相同,不会自身环化;
    (2)连接效率高;
    (3)用任何一种方法制备的DNA都可用这种方法连接。
    其缺点在于
    (1)方法复杂;
    (2)外源片段较难回收;
    (3)由于添加了同聚尾,可能会影响外源基因表达。
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