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简答题试述EI_ISA中的间接免疫吸附测定法的主要步骤,并指出一种常用的酶及底物。
  • E.LISA是一种检测血清中是否含特定抗体的方法,步骤为:
    (1)将已知抗原吸附在微量滴定板的小孔内,用缓冲液洗涤3次。
    (2)加待检抗血清,如其中含有特定抗体,则与抗原发生特定结合,随即用缓冲液洗涤3次,洗去多余抗体。
    (3)加酶联抗抗体(抗入球蛋白抗体),使它与己吸附的抗原和抗体的复合物相结合,再洗3次,以除去未吸附的酶联抗抗体。
    (4)加入该酶的底物,使底物分解并产生颜色,待终止反应后,依底物颜色深浅,即可知样品中的抗体含量。
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