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简答题结合实验阐述一种固定化菌体的方法和步骤。
  • 以酵母细胞的固定化为例,本实验固定化的方法是把细胞悬浮在海藻酸钠溶液中,滴进氯化钙溶液中,形成海藻酸钙凝胶小球。细胞包埋在凝胶的小孔中,制成固定化细胞。通过包埋法,对酵母活细胞进行固定。并对麦芽汁进行发酵实验。
    操作步骤
    ①调取活化培养24h的酵母斜面菌种一环,接种于10ml麦芽汁试管中,25℃摇瓶培养48h。
    ②取酵母菌体悬浮液10mL,悬浮在10mL4%海藻酸钠溶液(冷却到约50度不太烫手)中混合均匀。
    ③用灭过菌的注射器吸取上述悬浮液,逐滴滴入到50mL氯化钙溶液中,浸泡30~120min使之形成凝胶珠。④待凝胶珠在溶液中泡30min后,滤出凝胶珠得到固定化细胞。转到200ml三角瓶中,用无菌水洗涤3次,胶珠转入用75%乙醇消毒过的可乐瓶中注入约2/3体积的无菌麦芽汁,密闭在25℃下发酵7-9天,注意适当放气勿使其爆炸。
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