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简答题如何实现疾病基因的克隆？
  • 基因克隆通常指将目的基因插入到某载体内，利用载体在宿主细胞中大量繁殖以获得足够量的拷贝，从而进行基因结构和功能的分析。基因克隆即是在体外通过人工剪、接，将不同来源的DNA分子组成一个重组体，然后插入宿主细胞进行扩增或表达，通常包括以下几个步骤：
    ①目的基因的提取：供体生物基因或称外源基因的提取；
    ②限制性酶切：目的基因切成不同大小的片段
    ③酶接：连接到另一个DNA分子上（克隆载体）
    ④转化：将这个重组DNA分子转入到受体细胞
    ⑤筛选和鉴定：对吸收了重组DNA的受体细胞进行筛选和鉴定
    ⑥基因表达：对含有重组DNA的细胞进行大量培养，检测外源基因是否表达。

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