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简答题简述核酸分子杂交的原理和基本过程。
  • ⑴核酸分子杂交的基本原理是具有互补序列的两条核酸单链在一定条件下按碱基互补配对原则形成双链的过程。其基本原理是：具有互补序列的两条单链核酸分子在一定条件下（适当温度、离子强度等），按碱基互补配对原则，重新形成双链。这一过程中核酸分子经历了变性和复性的变化，以及复性过程中各分子间建的形成和断裂等。杂交的双方是已知序列和待定序列，其中已知序列为探针，探针通常用于核素或非核素的示踪标记。
    ⑵以Southern印迹杂交为例，包括以下步骤：
    ①待测核酸样品的制备包括待测DNA和DNA的限制酶消化
    ②待测DNA样品的电泳分离。
    ③凝胶中核酸的变性
    ④Southern转膜：常用的转膜方法有毛细管虹吸印迹法、电转印法和真空转移法
    ⑤探针的制备
    ⑥Southern杂交，必须先进行预杂交
    ⑦杂交结果的检测：包括放射性核素探针的检测即放射自显影和非放射性核素探针的检测：地高辛标记探针的检测、生物素标记探针的检测。

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