试题详情
- 简答题如何提高转基因的表达水平。
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实现外源基因高效表达的种种途径包括:启动子的选择和改造;目的基因的改造;构建含有核基质结合区的表达载体;建立位点特异重组体系;利用细胞器定位信号和采用叶绿体进行转化等。
1.启动子是决定外源基因转录效率的关键因素,选择合适的启动子对于增强外源基因的表达量至关重要。
2.对于微生物或动物来源的基因由于表达机制的不同,在高等植物中往往表达效果不理想,这时如果在不改变氨基酸序列的前提下通过人工改造或重新合成,使之适于在植物体内表达,就可以大大提高有效蛋白的表达量。
3.目前,采用基因枪或农杆菌法导入的外源基因在宿主染色体上的整合大多是随机发生的,如外源基因整合在转录活跃的常染色质可能得到较好的表达。但高等植物的绝大多数细胞在特定阶段有90%以上的基因在转录上是不活跃的,插入到这部分染色质区的转基因其表达活性则会大大下降,甚至出现沉默。这时如果我们能建立位点特异的重组系统则可克服这一难题。
外源基因在植物组织细胞中表达时,其表达产物受细胞中大量蛋白酶的作用而降解,造成外源蛋白积累量的减少。因此,采取措施保护外源蛋白不受降解是实现转基因成功的重要一环。以植物抗虫基因工程为例,增加外源抗虫物质在植物细胞内的稳定性可有效提高转基因植物的抗虫效果。
4.叶绿体基因拷贝数大,为实现外源基因的超量表达提供了前提;可以定点整合方式导入外源基因从而消除位置效应和转基因沉默;具原核表达方式,可直接表达来自于原核生物的基因,且能以多顺反子的形式表达多个基因。这些都使叶绿体转化系统极具提高转基因表达的潜能。 关注下方微信公众号,在线模考后查看
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