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简答题生物样品测定前为什么要除去蛋白质?除去蛋白质的常用方法有哪些?
  • 去蛋白质的意义:使结合型药物释放出来,以便测定药物的总浓度;得到较“干净”的提取液,减少乳化,消除对测定的干扰;保护仪器,延长使用期限。
    常用的方法:
    1) 蛋白质沉淀法
    A.生成不溶性盐
    加入酸类(TCA、HClO4等)
    加入重金属盐(Zn2+ 、Cu2+ 、Ag+ )
    B.盐析和脱水
    加入中性盐((NH42SO4、NaCl )
    加入与水混溶的有机溶剂(甲醇、乙腈、丙酮)
    2)组织酶消化法(蛋白水解酶)
    酶消化法是在一定的pH范围、一定的温度和一定的反应时间下完成的。
    其特点是:水解条件温和,水解效率高,无乳化生成。
    有时可合用一些蛋白酶增活剂,以减少酶用量和缩短消化时间。
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