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简答题反相液相色谱中,常在流动相中加入酸(醋酸或磷酸)、缓冲溶液(KH2PO4等)来分析某些物质,分析结束后,为除去色谱柱上的酸、缓冲溶液或水溶性物质,不用100%的水来冲柱子,而常在水中加入5~10%有机溶剂,为什么?
  • 反相液相色谱中,固定相(C8和C18)是疏水性的,而流动相是极性(如:纯水)的,这种极性差别造成流动相和固定相之间的接触角超过90°,这意味着填料未被润湿。如果表面张力和接触角足够大,而孔径相对较小,结果可能是流动相被填料的多孔体系所排斥,不流过此多孔体系而直接从填料表面流过。由于填料中大约99%的面积是由位于微粒内部的小孔产生的,所以这种流动相完全受压排斥会造成填料保留性能的完全丧失。这种情况造成了固定相的“塌陷”。
    当使用纯水来洗柱子时,固定相的“塌陷”现象严重,水不流过多孔体系而直接从填料表面流过,被固定相吸附的缓冲液盐类物质无法得到清洗或清洗过程非常缓慢。在水中加入少量的甲醇或乙腈(~5%),可保证固定相的润湿,此时流动相流经所有微孔体系,从而实现对缓冲液盐类物质的清洗。
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