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简答题简述间接免疫荧光法（IFA）检测人血清出血热IgG抗体的具体操作步骤。
  • 1）用pH7.4，0.02mol/LPBS稀释待检血清，从1：20开始做2倍或4倍连续稀释至需要的稀释度；
    2）取出抗原片，用蒸馏水漂洗后，冷风吹干；
    3）用加样器依次从高稀释度到低稀释度逐个加入已稀释的待检血清，加入量以覆盖细胞抗原面为准（若为双份血清，最好上排为急性期血清，下排为恢复期血清），在37℃水浴箱湿盒孵育30～40分钟（每次试验同时设阳、阴性对照）；
    4）用PBS震荡洗涤3次，每次5分钟，再用蒸馏水洗涤1次脱盐，冷风吹干；
    5）用含1：3万的伊文思兰PBS按工作浓度稀释荧光结合物，滴加各孔（以覆盖细胞抗原面为准），在37℃水浴箱湿盒孵育30分钟；
    6）同4）洗涤、漂洗、吹干；
    7）荧光显微镜观察结果。

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