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简答题在纯化某一酶的过程中,测定了每一步骤样品的总活力及蛋白量,步骤1为初提,测得总蛋白为30,000mg,总活力单位为21,000U;步骤2为(NH4)SO4盐析,测得总蛋白为2,000mg,总活力单位为14,000U;步骤3为亲和层析,测得总蛋白为50mg,总活力单位为5,000U,试计算各步的纯化倍数和损耗率。
  • 设各步比活分别为x1、x2、x3,纯化倍数分别为y1、y2、y3,损耗率分别为z1、z2、z3。
    X.1=21000/30000=0.70(U/mg)
    X.2=14000/2000=7.0(U/mg)
    X.3=5000/50=100(U/mg)
    Y.1=1.0(倍)
    Y.2=x2/x1=7/0.7=10(倍)
    Y.3=x3/x1=100/0.7=143(倍)
    Z.1=1-100%=0%
    Z.2=(1-14000/21000)*100%=33.3%
    Z.3=(1-5000/21000)*100%=76.2%
    各步的纯化倍数分别为1.0、10和143倍,各步的损耗率分别为0%、33.3%和76.2%。
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