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简答题简述常用的光学成像技术。
  • 目前的光学成像技术主要包括荧光(fluorescence)和生物发光(bioluminescence)两种技术。
    荧光成像技术常用GFP、RFP及等近红外线(NIR)荧光素基因为报告基因。NIR荧光素是目前荧光成像研究的热点。将NIR荧光素与传送载体通过一段蛋白酶特异性肽段连接起来就形成了NIR探针。在原始状态由于存在荧光共振能量转移作用,NIR荧光素不发出荧光信号。当出现靶向蛋白水解酶将特异性肽底物降解时,荧光素与传送载体分离,荧光淬灭作用消失,NIR荧光素即释放出高达几百倍的荧光。通过这类探针能活体无创性检测多种蛋白酶的活性及疾病早期的病理现象,还能评价治疗效果。有点是组织穿透能力较强(可达数cm),影像信噪比较高。
    生物发光成像技术主要有两类报告基因:虫荧光素酶基因和Renilla虫荧光素酶基因,底物分别为虫荧光素和coelenterazine。通过分子克隆技术将荧光素酶基因插入靶基因,即可将所需研究的基因或细胞标记上荧光素酶,将标记好的细胞注入小鼠体内后, 观测前通过腹腔或静脉注射导入荧光素酶的底物—荧光素,即可在几分钟内产生发光现象。其优点是无自发荧光,所得影像的信噪比高,因此检测的敏感性与特异性均较高,目前被广泛应用于小动物全身成像。
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