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简答题试比较三大标记技术（荧光、放射、酶标记）异同、优缺点、应用。
  • 免疫标记检测技术的共同特点：①用标记抗体（或抗原）检测，仍保留抗体（或抗原）的特异性，且提高了抗原抗体反应检出的敏感性；②将标记物加入反应体系中，使发生抗原抗体反应后，应将未结合的标记抗体（或抗原）从反应系统中洗除去；③洗去游离标记物后，检测抗原—抗体复合物中标记物的多少来判断结果。或以测定洗出的未结合的标记物多少来判断结果。依不同试验条件而定。
    各种方法的不同点及应用：
    （1）免疫荧光法：将荧光染料与抗体分子进行化学联接，即为荧光标记抗体，用此荧光抗体去染组织或带特异抗原的细胞，对相应抗原进行定量或定位检查，可有直接荧光法和间接荧光法，后者更常用且灵敏度高，也可用双重荧光检测，即一种抗体标记异硫氰荧光素（黄绿色），另一种抗体用藻红蛋白荧光色素标记（红色），可同时检测两种不同抗原，如用单克隆抗体检测T细胞的亚类，免疫荧光法需用特殊的荧光显微镜，或检出仪器如FACS。
    （2）放射免疫法：根据竞争性结合的原理。定量的放射性同位素标记抗原与未标记抗原竞争结合定量的抗体。未标记的抗原加入越多，与抗体结合的标记的抗原越少，也就是未结合的标记抗原越多。在用活性炭或滑石粉吸附去除全部未与抗体结合的游离抗原，就可定量测定放射性核素标记的免疫复合物。如测血液中胰岛素含量，在胰岛素抗体和已知量的核素标记胰岛素的混合液中加入待检样品，最后测沉淀物中核素的含量，如果待检样品中含胰岛素量越大，则沉淀物上含放射性核素量越少。放射免疫法极为敏感，多用于检测激素（胰岛素、甲状腺素、醛固酮等）或蛋白质（甲胎蛋白，IgE、乙肝表面抗原）、维生素、药物、酶等。此法试剂昂贵，有放射性污染。
    （3）酶标免疫法：某些酶可使底物产生颜色变化，将此酶与抗原或抗体联接，不影响各自原有的生物活性而制备出酶标抗原或抗体，用它来检测抗原或抗体即为酶免疫法。此法简便、快速、灵敏度高、应用广泛。常用的EHSA法有：双抗体夹心法用于测抗原，先将特异抗体包被塑料板，再加入抗原的待检标本，让抗原与固相载体表面包被的抗体结合，洗出未结合的材料，再加入抗同一抗原的酶标记抗体，再洗去未结合的酶标抗体，加底物显色，用ELISA仪器检测颜色光密度，作定量检测，光密度越高，待检样品中含有抗原量越高。

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