试题详情
- 简答题有机溶剂沉淀（降低介电常数）：
- 利用酶等蛋白质在有机溶剂中的溶解度不同而使之分离的方法。
1.淀机理：降低溶液的介电常数；引起蛋白质脱水
2.用有机溶剂：丙酮乙醇甲醇，用量一般为酶液体积的2倍左右，终浓度为70%。
3.点：
优点：
①分辨率比盐析法高
②沉淀不需脱盐
③溶剂易蒸发，沉淀易离心。
缺点：
①容易引起蛋白质变性失活
②有机溶剂易燃、易爆，对安全要求较高。
4.响有机溶剂沉淀的因素
①温度：低温（0℃）操作。
②pH值：尽可能靠近其等电点。
③离子强度：采用<0.05mol/L的稀盐溶液，增加蛋白质在有机溶剂中的溶解度，目的：防止蛋白质变性
④蛋白质浓度：适当，一般为5〜20mg/ml 关注下方微信公众号，在线模考后查看
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