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简答题酵母菌原生质体融合育种的原理及操作步骤？
  • 原理：
    原生质体融合就是用酶法将细胞膜外侧的细胞壁除掉，制备成无细胞壁的球状细胞体即原生质体，将两种来源于微生物细胞A和B的原生质体，在融合诱导剂的存在下等量混合起来，可使原生质体表面形成电极性，相互之间容易吸引、脱水黏合而形成聚合物，进而使原生质体收缩变形，紧密接触处的膜先形成原生质桥，逐渐增大而实现融合。融合的原生质体在适当条件下可再生出细胞壁而形成一个新细胞。
    操作步骤：
    ①标记菌株的筛选和稳定性验证。
    ②酵母原生质体制备。
    ③等量原生质体加聚乙二醇促进融合。
    ④涂布于再生培养基，再生出菌落。
    ⑤选择性培养基上划线生长，分离验证，挑取融合子进一步试验、保藏。
    ⑥生产性能筛选。

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