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简答题现在对人类基因组的主要研究工作是进行基因组的序列测定。然而,有人根据人类基因组是由重复序列组成为由,认为反复对同一种DNA进行测序是不明智的。你能否拟定两份计划,一份计划应保证仅仅单一序列DNA被测序,第二个计划应允许仅仅转录的单一DNA序列被测序。请简述你的两份计划。
  • 计划一:进行一个复性实验,在从不同的温育时间取出等量样品。当所有重复DNA都发生退火时,从反应中去除双链DNA(可以使用一个仅能结合双链DNA的柱或过滤器)。接着继续进行复性反应直到所有的单拷贝DNA都发生复性;以这一单拷贝DNA建立克隆文库,用于测序。
    计划二:仅测序能够表达的单拷贝基因。用计划一中分离纯化得到的单一序列DNA与细胞总RNA杂交,使复性完全,然后从反应液中除去单链DNA,只有能表达的单拷贝DNA以DNA-RNA杂合体的形式留下来。克隆这一DNA并进行测序(现在可采用EST法,从细胞总RNA中制备表达序列的cDNA,进行测序)。
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