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简答题建立了一个基因文库后，如何鉴定一个携带目的基因的克隆？
  • 带有某一细菌基因的克隆通常可以直接看出来，因为基因表达引起了宿主细胞表型的可见变化。然而，真核生物的基因不都表达，则需用相应的方法来找出带有所需基因特定克隆。一个常用方法是菌落或原位杂交分析，具体方法如下：
    （1）从不同的克隆将少量菌落转移到硝酸纤维素滤膜上，固定于硝酸纤维素滤膜上，然后用NaOH使之变性。
    （2）用特异探针与膜杂交检测。探针必须能与所需的基因互补且被32P标记。探针可以是来自另一不同生物体的相关的基因，或是依据与基因特异相关蛋白质的氨基酸序列设计并经化学合成的一小段DNA分子。
    （3）探针只会与特定基因进行碱基配对（杂交），冲洗滤膜后，未结合上的标记探针会被除去。
    （4）烘干滤膜后进行放射自显影后，所需的克隆就以一个黑点在胶片上显示出来，这就是菌落或原位杂交分析。

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