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简答题cDNA文库有什么特点？其制备的流程如何？
  • 某种生物基因组转录的全部mRNA经反转录产生的cDNA片段分别与克隆载体重组，并将其引入到相应的宿主细胞中（一般为E.coli.）繁殖和扩增，理论上此群体就包含有该物种的全部mRNA信息，称该生物基因组的cDNA文库。
    特点：可得到表达序列信息；可直接用于外源基因的表达；可用于表达产物的分析；但是由于只能克隆表达性基因，其信息不全，不能得到全部基因的信息；同时由于真核生物基因表达经过加工，cDNA文库不能提供内含子信息等。
    基本步骤有4步：
    第一，细胞总RNA的提取和mRNA分离；
    第二，第一链cDNA合成；
    第三，第二链cDNA合成；
    第四，双链cDNA克隆进质粒或噬菌体载体并导入宿主中繁殖。

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