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简答题试述用凯氏定氮法测定饲料中粗蛋白含量的基本原理。
  • 实验原理:饲料中含氮物质包括纯蛋白质和氨化物(氨化物有氨基酸、酰胺、硝酸盐及铵盐等),两者总称为粗蛋白质。凯氏定氮法的基本原理是用硫酸分试样中蛋白质与氨化物,使它们含氮物都转变成氨气,氨气被浓硫酸吸收变为硫酸铵。硫酸铵在浓碱的作用下放出氨气。通过蒸馏,氨气随汽水顺着冷凝流入硼酸溶液,与之结合成为四硼酸铵,后者用盐酸标准液滴定,即可测定放出的氨氮量。根据氮量,乘以特定系数,一般为6.25,即可得出样本中粗蛋白质含量。
    上述过程中的化学反应如下:
    2CH3CHNH2COOH+13H2SO4→(NH4)2SO4+6CO2↑+12SO2↑+16H2O
    (NH4)2SO4+2NaOH→2NH3↑+2H2O+Na2SO4
    4H3BO3+NH3→NH4HB4O7+5H2O
    NH4HB4O7+HCl+5H2O→NH4Cl+4H3BO3
    实验步骤:分为消化、蒸馏、滴定三个方面,写出测定步骤。
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