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- 简答题简述革兰氏染色的原理以及步骤。
- 原理:革兰氏染色是基于细菌细胞壁特殊化学祖坟基础上的一种物理原因。通过初染与媒染操作后,在细菌细胞的膜或原生质体上染上了不溶于水的结晶紫与碘的复合物。革兰氏阳性细菌由于细胞壁厚,肽聚糖含量较高和其分子交联度较紧密,故在用乙醇处理不能在壁上溶出裂缝,因此结晶紫与碘复合物仍牢牢阻留在其细胞壁上,使其呈现紫色。反之,革兰氏阴性细菌引起壁薄,肽聚糖含量低和交联松散,遇乙醇后,肽聚糖网孔不易收缩,加上它的类脂含量高,所以当乙醇把类脂溶解后,在细胞壁上就会出现较大的缝隙,这样,结晶紫与碘的复合物就极易溶出细胞壁,经乙醇脱色后,细胞呈无色。这时,在经沙黄复染,使革兰氏阴性菌呈红色。步骤:涂片→干燥固定→结晶紫初染1’→水洗→碘液媒染1’→水洗→95%酒精脱色约30’→水洗→沙黄复染1’→水洗→干燥→油镜镜检
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