试题详情
- 简答题电泳回收酶切片段的基本流程如何？
- 1、在紫外灯下观察并确定欲回收的目的DNA片断的位置。
2、用刀片小心切除含目的DNA片断的凝胶置于eppendorf管中。
3、称量胶的重量。
5、按100mg胶加300μl6mol/LNaI的比例加入一定体积的NaI
6、60℃水浴约5分钟，直至凝胶完全溶解（中间要多摇晃几次以加速凝胶溶解）。
7、按100mg胶加5μlSilica的比例加入一定体积的Silica，并迅速混匀。
8、在冰上放置5分钟，5000rpm离心30秒后，吸掉上清液（吸上清液时，不要碰到Silica）。
9、加入1ml75%乙醇，迅速震荡使Silica分散均匀，5000rpm离心30秒后，吸掉上清液。
10、加入1ml75%乙醇，迅速震荡，12000rpm，离心2分钟后，彻底吸尽上清液，置于55℃烘箱约5分钟，直至烘干。
11、加20μl无菌水，用枪头揉碎Silica后放置约10分钟。
12、12000rpm，离心2分钟后吸取上清于干净eppendorf管中，4℃冰箱保藏备用。
13、取上述回收DNA片段5μl进行电泳，以检测其质量和浓度。 关注下方微信公众号，在线模考后查看
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