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简答题在物质的分离纯化中,和其它方法相比,色谱法基本特点有哪些?
  • 色谱学是一门以物理化学为基础的分离与纯化科学,与其他分离纯化法相比,它具有以下几个基本特点。
    1)分离效率高色谱分离的效率之高是其他分离技术所无法相比的,尤其是细颗粒多孔球型的高效填料问世后,使色谱柱的柱效有更大的提高。每米可达几十万的理论塔板数。
    2)应用范围广HPLC的应用范围之广也是其他分离技术无法相比的,从极性到非极性,离子型到非离子型,小分子到大分子,无机到有机及生物活性物质,以及其他热稳定性或热不稳定性的化合物,可以说无所不包。尤其是对生物样品的分离分析,是其他方法无法代替的。
    3)操作参数多色谱的可变操作参数之多也是其他分离技术无法相比的。流动相可用气体、液体或超临界流体。在气、液、流体中又有许多不同的物质可选用。固定相可用液、固两大类。在加上流动相的pH值、离子强度、有机溶剂的含量、分离温度等参数的变化,使整个分离过程随着上述各种参数的变化适应于各种不同的样品分离的需要,应用于各种困难复杂的场合。
    4)高灵敏度在线检测与其他分离手段相比,色谱具有高灵敏度在线检测的特性。根据不同的物理与化学的原理,HPLC具有不同的高灵敏度的检测器,适用于多种千差万别样品的需要。这些检测器不但稳定性好,信噪比高,同时都能进行连续的在线检测,及时掌握分离与纯化过程中的情况,保证在要求的纯度下得到最高的产率。
    5)快速分离HPLC由于采用了高压溶剂传输系统,即使采用高效细颗粒填料,也能保证分离过程在一定的线速下进行,而且由于单位柱长的柱效提高,柱长可以大大缩短,更加快了分离的速度,从而可以提高单位时间的产量。
    6)连续自动化操作电脑用于色谱分离过程以后,从最初的简单数据处理发展到目前作为控制操作的中心,使大量的样品可以按照事先设置好的程序进行完全自动连续的操作。
    色谱法正是由于上述这些特点,在生物技术蓬勃发展、迫切需要有效的分离纯化方法的今天,人们还是认为色谱是最理想的也是最有发展前景的一种分离与纯化生物大分子的方法。
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