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简答题为什么用同裂酶进行体外重组效率最高?
  • 同裂酶是指来源不同的限制酶切割DNA后,产生相同的末端。多数同裂酶产生的粘性末端并非完全一致而是有四个碱基相同,这样用同裂酶切割载体和目的基因后的连接产物常会失去原有的限制酶位点,这样用同裂酶进行重组时,限制酶切割反应后不用将该酶失活,即可直接进行重组连接,由于连接体系中原有限制酶存在,载体自连不会发生,从而保证了载体只同外源DNA的连接。
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