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简答题亲和层析中目标产物的洗脱有哪几种方法?各有何优缺点?
  • 特异性洗脱利用含有与亲和配基或目标产物具有亲和结合作用的小分子化合物溶液为洗脱剂,通过与亲和配基或目标产物的竞争性结合,脱附目标产物,洗脱条件温和,有利于保护目标产物的生物活性,另外,由于仅特异性洗脱目标产物,对特异性较低的体系或非特异性吸附较严重的物系,特异性洗脱法有利于提高目标产物的纯度。
    非特异性洗脱是通过调节pH值、离子强度、离子种类和温度等理化性质降低目标产物的亲和吸附作用,是较多采用的洗脱方法。优点为成本低,速度快,吸附介质再生容易。缺点是洗脱体积大,目标产物在洗脱中浓度较低。如果要提高浓度或是配基与目标产物结合较强时,要选择适当的pH值及离子强度或加入变性剂,如果选择不当,可能造成目标产物失活。
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