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简答题黏性末端连接法是最常用的连接方法，具有许多优点，但是也有一些不足，请指出这些不足之处。
  • 黏性末端连接法不足之处有：
    （1）载体易自身环化；
    （2）若是用同一种限制性内切核酸酶产生的黏性末端连接又不易定向克隆；
    （3）难插入特定的基因；
    （4）再者就是大片段DNA的重组率较低，即使用碱性磷酸酶处理了载体，防止了载体的自身环化，载体也有成环的倾向；
    （5）用这种方法产生的重组体往往含有不止一个外源片段或不止一个载体连接起来的串联重组体，增加筛选工作的困难。

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