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简答题解释PCR、DNA—PCR、RT—PCR、原位PCR和定量PCR？
  • （1）PCR是聚合酶链反应（Polymerase chain reaction）的英文缩写，是近年来发展起来的一种在体外特异扩增某一目的DNA片段的技术。
    （2）DNA—PCR：以DNA为模板，扩增特定核苷酸序列。主要用于检测特定基因或DNA片段的存在，并常与核酸分子杂交结合，分析检定基因突变。
    （3）RT—PCR：用提取的mRNA或总RNA（含有mRNA）为模板，通过逆转录扩增cDNA。是检测特定基因表达水平的主要方法之一，也是用于鉴别、诊断RNA病毒的重要技术。
    （4）原位PCR：与原位杂交一样，原位PCR也无需提取DNA/RNA，直接用组织切片和细胞进行PCR或RT—PCR。它既能鉴定含有靶DNA/RNA序列的细胞，又能确定靶DNA/RNA序列在细胞内或染色体上的位置。
    （5）定量PCR：PCR产物经凝胶电泳分离转移膜上，与放射性核素或化学发光标记的核酸探针杂交。根据放射自显影或化学发光后底板爆光的强弱，用密度计扫描定量。此法在基因诊断中应用甚广。

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