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简答题革兰氏染色的过程是什么?原理怎样?
  • 革兰氏染色是细菌学中最重要的鉴别反应,其步骤为:先用初染剂(结晶紫)进行染色;再用碘液进行媒染,然后用乙醇(或丙酮)脱色,最后用复染剂(如番红)复染,经此方法染色后大部分细菌可被区别为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。其机理:是由于两类细菌细胞壁的结构和组成不同而决定的。
    当用结晶紫初染后,所有细菌都被初染剂染为蓝紫色,碘作为媒染剂,能与结晶紫结合为结晶紫—碘的复合物,从而增加了染料与细菌的结合力,当用脱色剂处理时:革兰氏阳性细菌的细胞壁主要是肽聚糖形成的网状结构构成,壁厚,类脂质含量低,用乙醇脱色时细胞壁脱水,是肽聚糖层网状结构孔径缩小,透性降低,从而使结晶紫—碘的复合物不易被洗脱而保留与细胞内,经脱色和复染后仍保留初染剂的蓝紫色。
    革兰氏阴性菌的细胞壁肽聚糖层薄,类脂含量高,所以当脱色时,类脂质被乙醇溶解,细胞壁透性加大,使结晶紫—碘的复合物比较容易被洗脱出来,用复染剂复染后,细胞被染上复染剂的红色。
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