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简答题简述包涵体形成的原因及处理方法。
  • 大肠杆菌中目标产物的表达水平过高，超过正常代谢水平，过多表达产物聚集在细胞内，形成不溶性的包涵体。
    处理方法：胞外分泌型表达：离心（收集液相）→浓缩→纯化
    胞内表达：胞内可溶性表达：离心（收集菌体）→细胞破碎→离心（收集上清）→纯化
    不溶性包含体：离心（收集菌体）→细胞破碎→离心（收集沉淀）→包含体洗涤→目标蛋白变性溶解→复性→纯化。

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