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简答题Ames实验原理,常用菌株及其鉴定方法?
  • 原理:组氨酸缺陷型的鼠伤寒沙门氏菌在缺乏组氨酸的培养基上不能生长,但在加有突 变原的培养基上培养,则可使突变型产生回复突变成野生型,即恢复合成组氨酸的能力,能在缺乏组氨酸的培养基上生长成菌落,通过计数菌落出现数目就可以估算药物诱变性得强弱。 
    常用菌株及鉴定方法 
    1)组氨酸营养缺陷鉴定:培养基分两组,一组加入组氨酸和生物素,另一组只加入生物素。在无组氨酸的培养基中无法生存的即为组氨酸营养缺陷型菌株。 
    2)深粗糙型(rfa)鉴定:因突变型的菌株脂多糖屏障缺陷,结晶紫可进入杀灭。所以在染了结晶紫的培养基上划线接种,有益菌圈的即突变型。 
    3)uvrB缺失鉴定(紫外线敏感试验):接种,黑纸盖一半,UV照24h,UV侧无菌生长,黑纸侧有菌生长,即为UV敏感。 
    4)R因子测定(氨苄青霉素耐药试验):家氨苄青霉素,有抑菌圈的无抗性,无抑菌圈的有R因子。 
    5)自发回变数测定:TA97(90-180),TA98(15-60),TA100(25-200),TA102(240-360)
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