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简答题简述基因工程操作的主要步骤。
  • 基因工程一般要经历5个基本步骤：
    1）获取目的基因
    两条途径：人工合成和从生物基因组DNA中直接分离得到。
    2）目的基因和载体DNA在体外连接
    用同一种限制性内切酶分别切割载体DNA和目的基因。在合适的条件下，载体质粒的黏性末端与目的基因的黏性末端因碱基互补配对而结合，再经适量的DNA连接酶作用，就形成了重组DNA分子。
    3）将重组的DNA分子引入合适的宿主细胞内
    重组DNA分子导入受体细胞的方法包括：转化和转导。
    4）选择、筛选含有目的基因的克隆
    检测的方法很多，一般根据载体的特征或者目的基因的特征。
    5）培养、观察目的基因的表达
    看目的基因能否在新的宿主细胞中定居下来，自我复制和表达，并稳定传代。

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