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简答题如何研究微生物细胞的化学组成和细胞结构?
  • 了解亚细胞结构的生理功能,需要将细胞破碎,分离出各种不同的亚细胞结构后,再加以研究。
    (一)化学组成
    ① 细胞鲜重、干重和含水量测定
    细胞鲜重(fresh weight) :在液体培养基中培养的微生物,经过滤或离心收集菌体细胞,洗净附在细胞表面的残留培养基,并尽量吸去细胞外所附着的水分,然后称重,即得细胞的鲜重,以每升培养液中所含有的细胞鲜重(g/l)表示。
    细胞干重(dry weight):将一定重量的鲜细胞,在105℃高温下,或在低温(60 ℃)真空下干燥至恒重,测出细胞干重,通常以g/l或mg/ml表示。
    含水量(Water content):(鲜重-干重)/鲜重×100%,即为含水量,以鲜重的百分率表示。
    ② 无机无素分析
    碳的含量:测燃烧时所放出的CO2量。在各种微生物细胞中比较恒定。占细胞干重的50%±5%。
    氮的含量:采用的Kjedahl定氮法。只能测出细胞中的氨态氮,测不出硝态氮或偶氮中的氮,也测不出嘌啶和嘧啶环中的氮。在单细胞微生物中的含量(8%-15%)高于在丝状真菌细胞中的含量(5%)。用同位素标记测定法比较精确,其测定值要比用Kjedahl法所测出的数值高。考马斯亮兰法 (Bradford法) ,Folin酚法(Lowry法) 其它无机元素含量
    ③ 生物分子的分离
    (二)细胞结构
    ① 细胞破碎
    机械法、研磨法、压榨法、超声波法、非机械法、渗透冲击(osmotic shock)、酶溶法
    ② 亚细胞结构的分离
    采用离心法,自细胞破碎液中分离不同的亚细胞结构
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