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简答题试述细菌革兰氏染色的方法步骤和机理,染色结果。举出G+和G—的细菌的菌例。
  • 基本步骤:
    ①结晶紫初染色1分钟;
    ②碘液媒染1分钟;
    ③95%乙醇脱色;
    ④番红复染1分钟。
    结果:G+细菌呈紫色,G-细菌呈红色。机理:G+细菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次多和交联致密,故遇脱色剂乙醇处理时,因失水而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇的处理不会融出缝隙,因此能把结晶紫和碘的复合物牢牢留在壁内,使其保持紫色。反之,G-细菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄和交联度差,遇脱色剂乙醇后,以类脂为主的外膜迅速溶解,这时薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫和碘的复合物的溶出,因此细胞褪成无色。这时,再经沙黄等红色染料复染,就使G-细菌呈现红色,而G+细菌则仍保留最初的紫色了。
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