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简答题如何提高真核基因在原核宿主中的表达效率?
  • (1)选择合适载体,提高翻译水平
    强启动子——提高转录水平
    核糖体结合位点(ATG-SD)距离合适
    在基因重组过程中应将结构基因接于SD序列之后.以便为mRNA提供核糖体结合位点,提高真核基因表达效率。
    避免产物降解:分泌/融合表达;(融合蛋白表达后再去除原核肽段)
    (2)选择合适宿主(如Lac启动子——LacI菌;PL/PR——CI857溶源菌)
    (3)调节宿主细胞代谢
    为保持宿主正常生长速度及重组转化体稳定性,维持产物的高效表达,必需采用适当方法,调节细胞代谢。目前,调节细胞代谢方法很多。如营养物浓度控制、产物诱导表达、载体诱导复制及促进产物分泌等。
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