试题详情
- 简答题影响凝胶过滤色谱分离效果的因素。
- 流速
影响洗脱液流速的因素：洗脱液加在柱上的压力（为保持层析过程中恒定的压力，可使用恒压瓶）；
凝胶交联度；凝胶颗粒大小。
流速过低：样品横向扩散增大，峰变宽，分辨率降低，洗脱时间长流速过高：洗脱峰重叠，柱压增大，分离效果变差线性流速控制在2～10cm/h
加样体积
体积过大：平台洗脱峰或相邻峰重叠
体积过小：目的蛋白收集量少、稀释倍数大、浓度低
样品浓度
进样前，样品应高度浓缩，浓度为10～20mg/ml分组分离&脱盐除杂：适当提高样品浓度分级分离&分析性实验：浓度低
离子强度
可防止蛋白质与蛋白质之间或与凝胶介质之间的相互作用常用盐溶液：20-100mmol/LNaCl浓度过高引起凝胶柱床体积变化 关注下方微信公众号，在线模考后查看
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