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简答题简述用细胞培养进行流感病毒分离培养的操作步骤。
  • 1）细胞传代：细胞按常规方法消化后，稀释，分装T25小瓶，37℃温箱培养。
    2）标本接种：长成单层的细胞瓶，倒掉营养液，用Hank，s洗3遍，每瓶接种标本1ml，34℃吸附1小时，加入维持液（含胰酶、不含小牛血清）6ml，每份标本接种2瓶，同时做正常细胞对照。
    3）标本培养：接种标本的细胞瓶，放34℃培养7天，隔日镜下观察一次。
    4）标本收获：细胞颗粒增多，变圆，最后脱落，也可呈网状。出现细胞病变者用豚鼠血球进行血凝素测定，细胞病变明显时收获，无病变及血凝阴性的标本盲传，仍为阴性时报告阴性。

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