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简答题写出至少三种分离纯化酶蛋白的方法,并作简要叙述。
  • 沉淀分离:沉淀分离是通过改变某些条件或添加某种物质,使酶的溶解度降低,而从溶液中析出,与其它溶质分离的技术过程。通常包括盐析沉淀,等电点沉淀,有机溶剂沉淀,复合沉淀,选择性变性沉淀。
    离心分离:离心分离是借助于离心机旋转所产生的离心力,使不同大小,不同密度的物质分离的过程。通过调节离心速度或者其他条件的大小,可以讲密度或者分子量不同的物质沉降分离。
    过滤:根据过滤介质截留的物质颗粒大小不同,来达到过滤的目的;通常包括粗滤,微滤,超滤,反渗透。
    膜分离:借由一定孔径的高分子薄膜将不同大小,不同形状和不同特性的物质颗粒和分推动力的不同,膜分离可以分为:
    ①加压膜分离:包括微滤,超滤,反渗透。
    ②电场膜分离:包括电渗析和离子交换膜渗析。
    ③扩散膜分离:主要是透析
    层析分离:利用混合物中各组分的物理化学性质的差别,使各组分以不同程度分布在两个相中,其中一个相为固定的(称为固定相)另一个相则流过此固定相(称为流动相),并使各组分以不同速度移动,从而达到分离的目的。主要的层析方法有:吸附层析;分配层析;离子交换层析;凝胶层析;亲和层析;层析聚焦
    电泳分离:是带电粒子在电场中向着与其本身所带电荷相反的电极移动的过程。
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