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简答题Klenow片段有几种酶活性？说明其主要用途。
  • K.lenow片段有5’→3’聚合酶活性和3’→5’外切酶活性，无5’→3’外切酶活性。
    主要用途：
    ①补平限制性内切酶切割DNA产生的3’凹端；
    ②用[32P]dNTP补平3’凹端，末端标记DNA片段；
    ③对带3’突出端DNA末端标记；
    ④cDNA克隆中，用于合成cDNA第二链；
    ⑤在体外诱变中，从单链模板合成双链DNA；
    ⑥应用双脱氧链末端终止法进行DNA测序。

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