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简答题常用的亲和吸附介质有哪些？
  • （1）酶的抑制剂
    酶的抑制剂有天然的生物大分子，也有小分子化合物。例如胰蛋白酶的天然蛋白质类抑制剂有胰脏蛋白酶抑制剂（pancreatictrypsininhibitor；PTI）等，小分子抑制剂有苄脒（benzamidinE.、精氨酸和赖氨酸等，均可作为亲和纯化胰蛋白酶的配基。
    （2）抗体
    利用抗体为配基的亲和色谱又称免疫亲和色谱（immuno-affinitychromatography）。抗体与抗原之间的Keq一般为107～1012L/mol。因此，利用免疫亲和色谱法是高度纯化蛋白质类生物大分子的有效手段。（3）A蛋白
    proteinA为分子量约42kD的蛋白质，与IgG具有很强的亲和作用，结合部位为IgG分子的Fc片段。A蛋白分子上含有5个Fc片段可结合部位。
    不同IgG的Fc片段的结构非常相似，因此A蛋白可作为各种抗体的亲和配基，但不同抗体的结合常数有所不同。
    A蛋白与抗体结合并不影响抗体与抗原的结合能力，因此A蛋白也可用于分离抗原-抗体的免疫复合体。（4）凝集素
    凝集素（lectin）是与糖特异性结合的蛋白质（酶和抗体除外）的总称。
    伴刀豆球蛋白A（concanavalinA，conA.可用做糖蛋白、多糖、糖脂等含糖生物大分子的分析、纯化。pH＜5.6时conA为二聚体，分子量为52kD；pH＞5.6时为四聚体，分子量为102kD，两个亚基（subunit）之间通过二硫键结合。因此，在利用conA为配基的亲和色谱操作中，操作条件应当适宜。（5）辅酶和磷酸腺苷脱氢酶和激酶与辅酶之间具有亲和结合作用。辅酶主要有NAD（nicotinamideadeninedinucleotidE.、NADP（NADphosphatE.和ATP（adenosinetriphosphatE.等。这些辅酶可用做脱氢酶和激酶的亲和配基。
    AMP（adenosine5’-monophosphatE.、ADP（adenosine2’，5’-diphosphatE.的腺苷部分与上述辅酶的结构类似，可用做这些酶的亲和配基。
    （6）三嗪类色素
    利用色素为配基的亲和色谱法又称色素亲和色谱（Dye-ligandaffinitychromatography）。Triazinedyes是一类分子内含有三嗪环的合成染料，与NAD的结合部位相同，又称为生体模拟色素（biomimeticdyE.。除脱氢酶和激酶外，三嗪类色素还与血清白蛋白、干扰素、核酸酶和糖解酶等具有很高的亲和力。
    （7）过渡金属离子
    Cu2+，Ni2+，Zn2+和Co2+等过渡金属离子可通过与亚胺二乙酸（IDA.或三羧甲基乙二胺（TED.形成螯合金属盐固定在固定相粒子表面，用做亲和吸附蛋白质的配基。这种利用金属离子为配基的亲和色谱一般称为金属螯合色谱（metalchelatechromatography）或固定化金属离子亲和色谱（immobilizedmetalaffinitychromato-graphy，IMAC.。
    （8）组氨酸
    组氨酸可与蛋白质发生亲和结合作用：静电和疏水性相互作用均有可能参与亲和结合。
    在盐浓度较低和pH约等于目标蛋白质pI的溶液中，固定化组氨酸的亲和吸附作用最强，随着盐浓度增大，亲和吸附作用降低。
    （9）肝素
    肝素（heparin）是存在于哺乳动物的肝、肺、肠等脏器中的酸性多糖类物质，分子量一般为5至30kD，具有抗凝血作用。
    肝素与脂蛋白、脂肪酶、甾体受体、限制性核酸内切酶、抗凝血酶、凝血蛋白质等具有亲和作用，可用作这些物质的亲和配基。
    肝素的亲和结合作用在中性pH和低浓度盐溶液中较强，随着盐浓度的增大结合作用降低

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