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简答题影响限制酶活性的因素(DNA操作)。
  • ①底物(DNA.的纯度:DNase最重要,其次为蛋白质、SDS、EDTA、酚、氯仿等
    ②DNA结构的影响:环状DNA比线性DNA的稳定性高
    ③反应温度:大多数限制酶的最佳反应温度为37℃,但要注意个别限制酶要求的最佳反应温度,如TaqⅠ为65℃
    ④反应体系中的缓冲液成分:Mg++的激活作用,β-巯基乙醇、二硫苏糖醇和牛血清蛋白对酶的稳定作用。
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