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简答题核酸探针的种类有哪些?各有什么特点?
  • A.基因探针根据标记方法不同可粗分为放射性探针和非放射性探针两大类。
    B.根据探针的核酸性质不同又可分为DNA探针,RNA探针,cDNA探针及寡核苷酸探针等几类。
    C.DNA探针还有单链和双链之分
    各自特点:
    DNA探针:最常用的核酸探针;主要特点有:
    1.这类探针多克隆在质粒载体中,可以无限繁殖,取之不尽,制备方法简便。
    2.DNA探针不易降解。一般可有效抑制DNA酶活性。
    3.DNA探针的标记方法较成熟,有多种方法可供选择。(多为某一基因的全部或部分序列,或某一非编码序列,须是特异的)
    cDNA探针:互补于mRNA的DNA分子(一般都为编码序列)。cDNA是由RNA经逆转录酶催化产生的不含有内含子序列,尤其适合于基本表达的检测。
    RNA探针:主要用于研究目的,而不是用于检测。高杂交效率,但也易降解、标记方法复杂(标记效率低)。
    寡核酸探针:
    1.链短、序列复杂度低、分子量小,所以和等量靶位点完全杂交的时间比克隆探针短。
    2.寡核苷酸探针可识别靶序列内1个碱基对变化。
    3.一次可大量合成寡核苷酸探针,价格低廉,可用酶学或化学方法修饰以进行非放射性标记物的标记。
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