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简答题什么是定量PCR的Ct值？Ct值是如何确定的？
  • Cycle threshold（Ct）：每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值时所经历的循环数，即在PCR中，荧光信号开始由本底进入指数增长的拐点处所对应的循环数。
    Ct值的含义是：PCR扩增过程中，荧光信号开始由本底进入指数增长阶段的拐点所对应的循环次数。
    确定：PCR反应的前15个循环的荧光信号作为荧光本底信号，荧光阈值的缺省没置是3～15个循环的荧光信号的标准偏差的10倍。实验操作中，Ct值定义为极限上方产生可检测到的统计学上显著的荧光发射所对应的PCR循环次数。“基线上方”也就是阈值高度的量化，定义是基线范围内荧光信号强度标准偏差的10倍。阈值所在的横线与PCR扩增曲线的交点所指的PCR循环次数就是Ct值。Ct值越小，模板DNA的起始拷贝数越多；Ct值越大，反之。正常：18～30。Ct值取决于阈值，阈值取决于基线，基线取决于试验质量。

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