试题详情
- 简答题构建一个理想的cDNA文库需要考虑的因素有哪些?
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A.cDNA文库的质量
(1)文库的代表性:是指文库中包含的重组cDNA分子是否能完整地反映出来源细胞中表达的全部信息(即mRNA种类),是体现文库质量的最重要指标。
(2)重组cDNA片段的序列完整性:5’端非翻译区,中间的编码序列和3’端非翻译区,文库中重组cDNA片段尽可能完整的反应出天然基因的结构,cDNA是否完整,对文库使用价值的影响并不是绝对的 完整性这一指标要根据研究目的及筛选方法来灵活考虑,使细胞中表达出的mRNA在构建的cDNA文库中尽可能含有相应其各部分序列的重叠cDNA片段是其中一种折中的做法。
B.文库筛选可选择的具体方法,决定文库筛选方法的主要因素是
1.构建文库的克隆载体系统;
2.相应的宿主细胞系统。
最理想的情况是对于具体构建出的一个cDNA文库,应能够使用多种筛选方法,有效地分离鉴定出目的基因,从而使研究者能够在已有研究条件上,在文库筛选的具体方法上有灵活的选择余地。 关注下方微信公众号,在线模考后查看
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