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简答题酵母双杂交系统(两个Pr相互作用)的原理是什么?一般由哪几部分组成?
  • 原理:在这一系统中,与诱饵蛋白融合的DNA-BD(DNA结合域)和与文库猎物蛋白融合的AD(转录激活域)均来自GAL4相应的结构域.将诱饵蛋白与猎物蛋白的编码质粒分别导入同一个GAL4缺失的酵母细胞中,通过两种相互作用蛋白结合形成复合物,可以重建GAL4的活性,转录激活相应的效应基因。
    三个基本组成部分:
    1.编码靶蛋白与DNA结合域融合蛋白的表达质粒.这种靶蛋白在双杂交系统中专称诱饵蛋白;
    2.cDNA质粒表达文库,文库cDNA表达出的蛋白与转录激活域形成融合蛋白,这些蛋白统称为猎物蛋白;
    3.能反映出体内转录因子活性重建的宿主酵母菌及体现出这种活性的报道基因系统。
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