试题详情
- 简答题简述寡核苷酸介导的定点诱变技术的原理。
- 基本原理是：利用Klenow片段（DNA聚合酶I大片段）延伸与单链环状DNA模板相配对的寡核苷酸引物，这个寡核苷酸引物除了有一处与模板的碱基错配外，其余部分均与模板互补，由寡核苷酸的错配处诱发突变，并在体外新合成一个杂合双链DNA，用T4DNA连接酶将新合成的杂合双链DNA连接成双链闭环DNA分子，将体外合成的杂合闭环双链DNA转化到E.coli细胞，由于环状DNA复制的特点，就会同时产生野生型与诱变型两种DNA分子，最后通过筛选，将诱变型DNA分子筛选出来。
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