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简答题Southern印迹杂交、Northern印迹杂交及Western免疫印迹彼此之间有哪些不同?
  • (1)检测目标物质不同:Southern印迹杂交检测的是DNA,Northern印迹杂交检测是RNA,Western免疫印迹杂交检测的是蛋白质。
    (2)所用凝胶不同:Southern印迹杂交和Northern印迹杂交用的是琼脂糖凝胶,而Western免疫印迹用的是SDS-聚丙烯酰胺凝胶。
    (3)是否变性电泳不同:Southern印迹杂交是跑非变性琼脂糖凝胶电泳,电泳之后在凝胶上用NaOH处理使DNA变性,然后转印;Northern印迹杂交实在电泳上样前用甲基氢氧化银、乙二醛或甲醛使RNA变性,而不用NaOH,因为它会水解RNA的2’-OH;Western免疫印迹则是跑变性的聚丙烯酰胺电泳或非变性的聚丙烯酰胺电泳。
    (4)探针不同:Southern印迹杂交、Northern印迹杂交的探针是单链的DNA或RNA,而Western免疫印迹用的探针是特异性抗体蛋白质,而非核酸。
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