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简答题用什么试剂可将胰岛素链间的二硫键打开与还原?如果要打开牛胰岛素核酸酶链内的二硫键,则在反应体系中还必须加入什么试剂?蛋白质变性时,为防止生成的-SH基重新被氧化,可加入什么试剂来保护?
  • 1.最常用的打开二硫键的方法是使用巯基试剂,例如巯基乙醇,可使参与二硫键的2个半胱氨酸还原为带有游离巯基的半胱氨酸。
    2.为了使还原反应能顺利进行,通常加入一些变性剂,如高浓度的尿素等。
    3.加入过量的还原剂可以防止还原所得的巯基被重新氧化。如果不准备使肽链重氧化,而是进一步进行结构化学结构的研究,可以将巯基转化为其他的修饰形式,例如和羧甲基化等烷化剂反应。除了已介绍的还原羧甲基化,还有过甲酸氧化法和亚硫酸还原法。
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